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Les compositions de deux milieux de culture utilisés très fréquemment en culture in vitro sont retranscrites ci-dessous.
Le Milieu de Murashige et Skoog, dit "Milieu de M.S.", et le milieu de Knudson C modifié par Morel utilisé notamment en culture d'orchidées.
Les milieux de culture sont préparés à partir de solutions mères: solutions concentrées de macro -éléments, micro-éléments, FeNa2EDTA et Vitamines.
Ces milieux peuvent être modifiés si besoin selon les problèmes rencontrés.
Le milieu de culture final contiendra également un sucre, en général du saccharose purifié, un gélifiant s'il s'agit d'un milieu solide et des phytohormones si besoin, cytokinine, auxine ou gibbérellines, ainsi que diverses autres substances si nécessaire. Il faudra ajuster le pH aux alentours de 5,5- 5,7.
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Nous pouvons vous fournir les poudres pour fabriquer ces milieux ainsi que le protocole d'utilisation , aussi bien sous forme de solutions mères, poudres dosées pour 1 l, ou milieux stérilisés en tubes tout prêts à ensemencer ici.
Milieu de Murashige & Skoog
Murashige T. et Skoog F., Physiol. Plant. 15,473-497, 1962 Travaux sur Nicotiana tabacum
Macro-éléments en mg/l
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CaCl2, 2 H2O 440.00
KH2PO4 170.00
KNO3 1 900.00
MgSO4, 7 H2O 370.00
NH4NO3 1 650.00
Micro-éléments en mg/l
CoCl2.6H2O 0.025
CuSo4.5H2O 0.025
H3BO3 6.2
KI 0.83
MnSO4.4 H2O 22.3
Na2MoO4.2H2O 0.25
ZnSO4.7H2O 8.60
Fer chélaté en mg/l
FeSO4.7H2O 27.8
Na2EDTA 37.3
Vitamines en mg/l
Glycine 2.00
Myo-inositol 100.00
Acide nicotinique 0.50
Pyridoxine HCl 0.50
Thiamine HCl 0.10
Milieu de Knudson C modifié par Morel
Morel G., Cym. Soc. News, 20,1965
Macro-éléments en mg/l
Ca(NO3)2 241.30
KH2PO4 250.00
KCl 250.00
MgSO4 122.15
NH4NO3 500.00
(NH4)2SO4 500.00
Micro-éléments en mg/l
FeSO4.7H2O 25.00
MnSO4.H2O 5.68