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Ressources

Les compositions de deux milieux de culture utilisés très fréquemment en culture in vitro sont retranscrites ci-dessous.

 

Le Milieu de Murashige et Skoog, dit "Milieu de M.S.", et le milieu de Knudson C modifié par Morel  utilisé notamment en culture d'orchidées. 

 

Les milieux de culture sont préparés à partir de solutions mères: solutions concentrées de macro -éléments, micro-éléments, FeNa2EDTA et Vitamines.

Ces milieux peuvent être modifiés si besoin selon les problèmes rencontrés. 

 

Le milieu de culture final contiendra également un sucre, en général du saccharose purifié, un gélifiant s'il s'agit d'un milieu solide et des phytohormones si besoin, cytokinine, auxine ou gibbérellines, ainsi que diverses autres substances si nécessaire. Il faudra ajuster le pH aux alentours de 5,5- 5,7.

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Nous pouvons vous fournir les poudres pour fabriquer ces milieux ainsi que le protocole d'utilisation , aussi bien sous forme de solutions mères, poudres dosées pour 1 l, ou milieux stérilisés en tubes tout prêts à ensemencer ici.

Milieu de Murashige & Skoog

Murashige T. et Skoog F., Physiol. Plant. 15,473-497, 1962  Travaux sur Nicotiana tabacum

 

Macro-éléments en mg/l

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CaCl2, 2 H2O      440.00 

KH2PO4              170.00

KNO3                1 900.00

MgSO4, 7 H2O     370.00

NH4NO3            1 650.00

 

Micro-éléments en mg/l

 

CoCl2.6H2O          0.025 

CuSo4.5H2O         0.025

H3BO3                   6.2

KI                            0.83

MnSO4.4 H2O      22.3

Na2MoO4.2H2O    0.25

ZnSO4.7H2O         8.60

 

Fer chélaté en mg/l

 

FeSO4.7H2O          27.8

Na2EDTA               37.3

 

Vitamines en mg/l

 

Glycine                    2.00 

Myo-inositol         100.00

Acide nicotinique     0.50

Pyridoxine HCl         0.50

Thiamine   HCl         0.10

Milieu de Knudson C modifié par Morel

Morel G., Cym. Soc. News, 20,1965

 

Macro-éléments en mg/l

 

Ca(NO3)2             241.30

KH2PO4               250.00

KCl                       250.00

MgSO4                 122.15

NH4NO3               500.00

(NH4)2SO4           500.00

 

 

Micro-éléments en mg/l

 

FeSO4.7H2O          25.00

MnSO4.H2O             5.68

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